服務(wù)熱線
021-59989018
歡迎訪問上海研生實業(yè)有限公司網(wǎng)站
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:681
更新時間:2024-11-04
小鼠胰島細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胰腺組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7066 |
細胞簡介:
小鼠胰島分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰島細胞作為糖尿病新藥的細胞篩選模型需保持其結(jié)構(gòu)完整、生理功能穩(wěn)定和足夠長的存活時間。胰島占胰腺總質(zhì)量的1%-2%,每個胰島大概含有1000個細胞。胰島移植可消除常規(guī)治療產(chǎn)生的嚴重低血糖癥狀,具有創(chuàng)傷小及并發(fā)癥少等優(yōu)點,是最有前景的Ⅰ型糖尿病治療方案。移植胰島的獲得需經(jīng)過供體篩選、胰腺消化、胰島分離純化及結(jié)果鑒定等步驟,分離純化效果取決于原料及操作方法的選擇。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠胰島采用膠原酶灌注消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠胰島經(jīng)DTZ染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
碳酸氫 500g
SodiumBite 1kg
四硼酸 5kg
SodiumBorate,Decahydrate 500g
小鼠(E)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human immunoglobulin light chain lambda (lambda -IgLC) ELISA Kit 輕鏈lambda(λ-IgLC)試劑盒
Humaudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 人的牛血清白蛋白殘留檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
FishOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGP試劑盒魚骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量試劑盒20次
MouseCompleme4,C4ELISAKit小鼠補體蛋白4(C4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
FAAP24蛋白抗體
多配體聚糖結(jié)合蛋白1抗體
OMG重組小鼠 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-245, His 標簽) Protein
AATK peptide 細胞凋亡關(guān)聯(lián)酪激酶抗原 0.5mgAATK peptide 細胞凋亡關(guān)聯(lián)酪激酶抗原
CXCL10重組人 CXCL10 / Crg-2 蛋白 Protein
IFNL1 Protein Human 重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白
COLEC12 Protein Rat 重組大鼠 CLP1 / COLEC12 蛋白
蛋白二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)重組蛋白 Recombinant Protein Disulfide Isomerase (PDI)
IFNL1 Protein Human 重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白
APOA1重組小鼠 ApoA1 蛋白 Protein
SELL Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白
RPRD1B重組人 RPRD1B 蛋白 Protein
小鼠胰島細胞大鼠促生長激素釋放激素(GRH)試劑盒 ,英文名: GRH ELISA Kit
Mouse 1,3- beta D Pouguese glucosidase (1,3- beta D glucosidase) ELISA Kit 小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)試劑盒
ELISA 小鼠骨成型蛋白-4(mouse BMP-4) 進口分裝
CLIAKitforLILRB4(Humanleukocyteimmunoglobulin-likereceptorsubfamilyBmember4)ELISAKit人白細胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4
通用型ECL化學發(fā)光顯影試劑盒10次
ELISAKit17-KS雞17-同類固醇