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更新時(shí)間:2024-11-05
小鼠脊髓神經(jīng)干細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
脊髓 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 球形 | YS-01X8504 |
細(xì)胞簡介:
小鼠脊髓神經(jīng)干分離自脊髓組織;脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護(hù);是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個(gè)H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū),主要由神經(jīng)細(xì)胞構(gòu)成;在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),主要由有髓神經(jīng)纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié),31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)干細(xì)胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細(xì)胞,它可以通過不對等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細(xì)胞。需要強(qiáng)調(diào)的是,在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中,不同的神經(jīng)干細(xì)胞類型產(chǎn)生的子代細(xì)胞種類不同,分布也不同。神經(jīng)干細(xì)胞作為干細(xì)胞的一種,它具有其它所有干細(xì)胞的基本特征:具有自我維持和自我更新能力,具有多種分化潛能,具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細(xì)胞的能力,這種自我更新和分化潛能可以維持相當(dāng)長的時(shí)間甚至終生,對損傷和疾病具有反應(yīng)能力。神經(jīng)干細(xì)胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移,并向神經(jīng)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞分化的能力,已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù)和再生研究的熱點(diǎn),體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)模型是其基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用的前提。神經(jīng)干細(xì)胞在培養(yǎng)3-4d后,可形成神經(jīng)球,神經(jīng)球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脊髓神經(jīng)干采用消化后差速貼壁,結(jié)合神經(jīng)干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脊髓神經(jīng)經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài):球形
傳代特性:可傳1-3代左右
消化液:0.25%,Accutase
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠脊髓神經(jīng)干體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠乙型肝表面抗原試劑盒 小鼠乙型肝表面抗原試劑盒 小鼠乙型肝表面抗原試劑盒,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠乙型肝表面抗原試劑盒、小鼠乙型肝表面抗原試劑盒
小鼠乙型肝e抗原試劑盒 小鼠乙型肝e抗原試劑盒 小鼠乙型肝e抗原試劑盒,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠乙型肝e抗原試劑盒、小鼠乙型肝e抗原試劑盒
小鼠乙型肝e抗體試劑盒 小鼠乙型肝e抗體試劑盒 小鼠乙型肝e抗體試劑盒,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠乙型肝e抗體試劑盒、小鼠乙型肝e抗體試劑盒
小鼠胰高血糖素樣肽試劑盒 小鼠胰高血糖素樣肽試劑盒 小鼠胰高血糖素樣肽試劑盒,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠胰高血糖素樣肽試劑盒、小鼠胰高血糖素樣肽試劑盒
SLD5蛋白抗體
NBEAL1蛋白抗體
FGF14重組狗 FGF14 / SCA27 蛋白 Protein
NKB (Neurokinins B 0.5mgNKB (Neurokinins B) 神經(jīng)激肽B(抗原)
PTX3重組人 PTX3 / Pentraxin 3 / TSG-14 蛋白 Protein
CD3D & CD3E Protein Human 重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白
CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白
CK18(Cytokeratin 18 0.5mlCK18(Cytokeratin 18) 細(xì)胞角蛋白18抗原(C端)
CD3D & CD3E Protein Human 重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白
IL2RG重組小鼠 IL2RG 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
CD200R1 Protein Mouse 重組小鼠 CD200R1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
N6AMT1重組人 N6AMT1 / HEMK2 蛋白 Protein
小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat dopamine anspoer (DAT) ELISA Kit 大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)試劑盒
Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISAKit 人β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitfor(ADAM9)ELISAKit大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9
熒光素酶高通量篩選熒光試劑盒
MouseIerleukin15,IL-15ELISAKit小鼠白介素15(IL-15)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠脊髓神經(jīng)干細(xì)胞大鼠二酰基甘油(DAG/DG)試劑盒 ,英文名: DAG/DG ELISA Kit
Porcine endothelial niic oxide syhase (eNOS) ELISA Kit 豬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒
鴨特定基因序列(Duck)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMAC(Humanmembraneattackcomplex)ELISAKit人膜攻擊復(fù)合物
體液誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞合成酶((iNOS/NOS2/mNOS))活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitMHC/B雞主要組織相容性復(fù)合體
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