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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
兔虹膜色素上皮細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
兔虹膜色素上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：ID8+LUC小鼠卵巢上皮癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 HMC3 (人小膠質(zhì)細(xì)胞) 兔胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞 轉(zhuǎn)錄因子HRT3抗體 小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 即刻早期應(yīng)答蛋白5抗體 人源NK細(xì)胞 EIF2B2蛋白抗體
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問(wèn)量：711
更新時(shí)間：2024-11-05
產(chǎn)品特性Product characteristics
兔虹膜色素上皮細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
眼球 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X8366 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔虹膜色素上皮分離自眼球虹膜組織；虹膜是眼睛構(gòu)造的一部分，屬于眼球中層，位于血管膜的前部；在睫狀體前方虹膜，中心有一圓形開口，稱為瞳孔，猶如相機(jī)當(dāng)中可調(diào)整大小的光圈，內(nèi)含色素決定眼睛的顏色。日間光線較為強(qiáng)烈時(shí)，虹膜會(huì)收蹜，只使一小束光線穿透瞳孔，進(jìn)入眼睛；當(dāng)進(jìn)入黑暗環(huán)境中，虹膜就會(huì)往后退縮，使瞳孔變大，讓更多的光線進(jìn)入眼睛，多數(shù)的脊椎動(dòng)物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮細(xì)胞（IPE）是虹膜重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一，位于虹膜組織的后面，和視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞（RPE）同樣起源于神經(jīng)外胚葉層，可能具有相似的生物學(xué)功能，因此對(duì)IPE的研究將為防治因RPE結(jié)構(gòu)或功能異常而導(dǎo)致的眼底病提供新思路。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔虹膜色素上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔虹膜色素上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔虹膜色素上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠CD34(mouse CD34) 作用： ELISA 試劑盒 組裝/原裝
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(mouse sCD40L) 作用： ELISA 試劑盒 組裝/原裝
小鼠補(bǔ)體C3a(mouse C3a) 作用： ELISA 試劑盒 組裝/原裝
小鼠補(bǔ)體C5a(mouse C5a) 作用： ELISA 試劑盒 組裝/原裝
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白62抗體
小鼠抗人CD19單克隆抗體
FCGRT & B2M重組小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein
雌激素受體β(ERβ)重組蛋白 Recombinant Estrogen Receptor Beta (ERb)
EPHA2重組人 EphA2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標(biāo)簽)
CXCL9 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL9 / MIG / 僀?僀
ADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 0.5mgADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 ) 新型金屬基質(zhì)蛋白酶(抗原)
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標(biāo)簽)
FCGR2重組小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽) Protein
CHODL Protein Rat 重組大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SULT1A3重組人 SULT1A3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
小鼠高敏狀腺原酸(u-T3)ELISA 試劑盒
Human eosinophil chemotactic protein Eotaxin 2 (Eotaxin 2/CCL24) ELISA Kit 人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)試劑盒
Humanβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISAKit 人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)試劑盒分裝
Humanai-thymocyteglobulin,ATG試劑盒人抗細(xì)胞球蛋白(ATG)試劑盒
植物線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次
Humanansthyretin,TELISAKit人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)試劑盒
兔虹膜色素上皮細(xì)胞大鼠整合素α2(ITGα2)試劑盒 ，英文名： ITGα2 ELISA Kit
Mouse granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) ELISA Kit 小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒
MouseIerleukin15,IL-15ELISAKit 小鼠白介素15(IL-15)試劑盒分裝
CLIAKitforHumanglamicaciddecarboxylase,GADELISAKit人谷脫羧酶
物理法冰凍切片抗原修復(fù)處理試劑盒50次
ELISAKitPTHrP大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白
